BDCA2/CLEC4C：一种新型浆细胞样树突状细胞pDC标记物，干扰素α/β强效抑制剂，阻断SLE红斑狼疮！
日期：2023-08-09 11:27:27
近期，Rheumatology杂志发表了一篇题为“An immunomodulatory antibody-drug conjugate (ADC) targeting BDCA2 strongly suppresses pDC function and glucocorticoid responsive genes”的研究论文 [1]。该研究发现一种新型的BDCA2抗体偶联物（BDCA2-ADC），能够有效地抑制系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）。在SLE中，浆细胞样树突状细胞（pDC）过度产生I型干扰素（IFN-I），而BDCA2/CLEC4C被认为是这种自身免疫反应的关键。
BDCA2/CLEC4C是一种在浆细胞样树突状细胞pDC上表达的新型标记物。研究者将抗BDCA2抗体与糖皮质激素受体激动剂结合，形成BDCA2-ADC。实验表明BDCA2-ADC能抑制pDC中的IFN-I信号和糖皮质激素反应。这些数据表明，BDCA2具有双重机制作用于pDC。陆续研究证实，BDCA2/CLEC4C有望成为全球首个用于SLE治疗的ADC，为SLE患者提供更好的治疗选择！
1. 什么是浆细胞样树突状细胞（pDC）？
浆细胞样树突状细胞（pDC）是树突状细胞（DC）的一种亚类，专门用于分泌I型干扰素（IFN-I）。pDC通过大量分泌IFN-I来激活适应性免疫反应，并在机体抗病毒免疫中起关键作用。在免疫应答中，pDC通过TLR7和TLR9来识别病原体相关分子，并产生丰富的干扰素α（IFN-α）。IFN-α是一种强有力的抗病毒干扰素，可以抑制病毒的复制和传播，并激活其他免疫细胞参与免疫反应。pDC被认为是已知分泌IFN-α能力最强的细胞之一 [2-4]。
未成熟的pDC在人体的淋巴结、扁桃腺、外周血、脐带血以及成人和胎儿的胸腺、胎肝和胎骨髓中都有发现。pDC异常的活化和过度产生的IFN-α与自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮）、病毒感染（如乙型肝炎病毒HCV、HIV），以及某些白血病和淋巴瘤等肿瘤有关 [2, 5-8]。然而，这些疾病的发病机制非常复杂。根据现有研究，已鉴定了四种新的人类pDC表面标记物，它们分别是BDCA2、BDCA4、ILT-7和CD123 [2, 5-8]。
2. 什么是CLEC4C？
CLEC4C（也称为BDCA-2或CD303）是C型凝集素家族的第4个成员（C-type lectin domain family 4 member C）。CLEC4C是一类含有213个氨基酸的新的二型跨膜糖蛋白，属于钙依赖性凝集素家族。CLEC4C主要表达在pDC的表面，该受体的自然配体尚未明确。CLEC4C/BDCA-2的细胞外部分包含C型碳水化合物识别结构域（C-type carbohydrate recognition domain，CRD），该结构域具有与甘露糖、葡萄糖或氨基葡萄糖结合的C型动物凝集素相似的特征序列。然而，据报道BDCA-2选择性地结合以半乳糖为末端的双天冠N-链接糖。X射线晶体学和突变研究结果显示，甘露糖与保守的Ca2+结合在主要结合位点上，该位点具备C型碳水化合物识别结构域的特征 [7-9]。
CLEC4C/BDCA-2作为血浆树突状细胞的标记物之一。它在免疫系统中发挥重要作用，特别是在自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）。研究提示，BDCA-2可能通过一种依赖于钙动员和蛋白酪氨酸的机制，有效地抑制了浆细胞样树突状细胞中干扰素α/β产生的诱导。由于浆细胞样树突状细胞产生干扰素α/β被认为是系统性红斑狼疮的主要病理生理因素。因此，CLEC4C/BDCA-2成为阻断系统性红斑狼疮产生干扰素α/β的潜力靶点 [7-9]！
图1. CLEC4C/BDCA-2和其他含有C型CRD的2型跨膜受体的结构 [9]
3. CLEC4C在浆细胞样树突状细胞（pDC）免疫反应中的负向调控机制
CLEC4C/BDCA-2作为最新鉴定的pDC表面标记物之一，其胞外部分含有C型碳水化合物识别域，可以与甘露糖、葡萄糖或N-乙酰葡糖胺结合。虽然BDCA-2的胞内部分缺少已知的信号基序，但它与FcR γ链有关，并能通过FcR γ链在B细胞抗原受体样信号体中发出信号。激活BDCA-2会引发酪氨酸激酶（Syk）的活化、B细胞连接蛋白（SLP65）的聚集和磷脂酰肌醇特异性磷酯酶（PLCγ2）的活性。这个过程显示了BDCA-2在pDC中调节免疫应答和干扰素产生的机制（图2）[3, 10]。
PLCγ2的激活可能导致Ca2+流入并在浆细胞样树突状细胞pDC中起到负调节剂的作用。通过BDCA-2的信号传导途径减少NFKB（核因子κB）的活化，从而抑制I型干扰素（IFN-Ⅰ）的产生。因此，BDCA-2在pDC中可通过抑制干扰素产生，影响免疫应答，对免疫系统的调控具有重要影响（图2）[3, 10]。
图2. CLEC4C/BDCA-2在浆细胞样树突状细胞（pDC）免疫反应中的负向调控机制 [10]
4.CLEC4C在系统性红斑狼疮SLE和HCV等疾病中的作用
4.1 CLEC4C在系统性红斑狼疮SLE中的作用
系统性红斑狼疮（SLE）是一类累及多脏器的自身免疫性疾病，其发病机制至今未明。如前所述，pDC是免疫系统中重要的抗病毒防御细胞，它们负责产生大量的干扰素-α（IFN-I）以应对感染。然而，在SLE患者中，pDC功能异常和IFN-I的产生过高，引发免疫反应并促进炎症反应，从而加剧SLE的病情。因此，IFN-I被认为是导致SLE发展的关键因素之一 [11]。
目前，许多研究已证实CLEC4C/BDCA-2作为新型浆细胞样树突状细胞主要表达分子，可介导抗原捕获，是干扰素α/β的强效抑制剂，从而调节自身免疫性疾病的发展，尤其是系统性红斑狼疮。例如，24F4A是一种针对BDCA-2的人源化单克隆抗体（mAb）。通过在健康和SLE患者的血液样本上进行体外实验，验证了24F4A与BDCA2结合并引发其内化，从而抑制pDC通过TLR诱导的IFN-I产生 [12-13]。
4.2 CLEC4C在丙型肝炎病毒HCV中的作用
研究发现，BDCA-2/CLEC4与丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus，HCV）颗粒或感染细胞表面的分子结构相互作用，能够识别病原体并启动免疫反应。除了HCV，BDCA-2还可以识别其他病毒，如HIV、流感病毒和登革热病毒等。一旦与病原体结合，BDCA-2能够激活pDC，促使其产生大量的IFN-I，从而抑制病毒的复制和传播 [14]。
研究表明，BDCA-2/CLEC4与HCV E2蛋白相互作用，并影响pDC对HCV感染的免疫反应。使用ELISA和RT-PCR检测了E2对pDC产生IFN-α和其他炎症因子的影响，并使用Western blot检测了E2对pDC内信号通路的影响。结果显示，E2能够结合BDCA2，并抑制pDC对HCV感染肝细胞或TLR7激动剂的反应，从而降低IFN-α和其他炎症因子的产生 [14]。
4.3 CLEC4C在其它疾病中的作用
目前，虽然国内外关于CLEC4C/BDCA-2的报道和研究有限，但相关研究表明BDCA-2在多种疾病中可能扮演重要角色，包括慢性炎症、感染性疾病和自身免疫疾病。这些疾病涉及子宫内膜异位症，鼻炎，哮喘，糖尿病和淋巴结炎等 [15-17]。此外，BDCA-2还与疱疹病毒EBV，HIV，以及某些真菌感染相关 [10-18]。在血液瘤和实体瘤治疗方面，BDCA-2也可能发挥作用 [19-22]。
例如，BDCA-2在肿瘤型浆细胞样树突状细胞中是具有高度特异性的标记物，进一步研究认为抗BDCA-2（CD303）抗体有望作为诊断原始样浆细胞树突状细胞肿瘤（BPDCN）辅助工具，以提高诊断的准确性 [21]；CD4+CD56+血液皮肤肿瘤中的BDCA-2表达与肿瘤的特征和生存时间相关。通过对19例CD4+CD56+血液皮肤肿瘤的研究，发现其中10例肿瘤表达BDCA-2，而NK细胞系肿瘤中未观察到表达 [22]。
5. CLEC4C的临床在研药物
来自Pharmsnap的数据表明，目前全球针对CLEC4C/BDCA-2药物已有4款（Litifilimab；DB-2304；CBS-004；CDX-1402）。其中，渤健生物公司（Biogen, Inc.）开发的BDCA-2单抗BIIB 059（Litifilimab）是目前进展最迅速的一种药物。该药物通过抑制BDCA-2蛋白，减少炎性细胞因子如IFN-I的产生，从而能够有效治疗红斑狼疮。BIIB-059是全球唯一一款进入临床试验阶段的BDCA-2单抗。目前在美国，针对系统性红斑狼疮（SLE）的治疗已经进展至临床III期，而针对慢性皮肤红斑狼疮（CLE）的治疗则进展至临床II期。尽管目前的变化并不大，但这一领域的研究仍在不断进行，我们可以期待未来会有更多创新的CLEC4C/BDCA-2药物问世。
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CLEC4C蛋白
Purity was greater than 95% as determined by SDS-PAGE.(Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.
Immobilized Human CLEC4C at 2μg/mL can bind Anti-CLEC4C recombinant antibody (CSB-RA855470MA1HU)，the EC50 is 7.658-12.99 ng/mL.
参考文献：
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