稳转细胞株构建服务
稳转细胞株构建是指外源基因进入受体细胞并整合到细胞的染色体上,使目的抗原在宿主细胞膜表面进行长期稳定的表达。稳转细胞株在生物学研究中扮演着非常重要的角色,广泛用于重组蛋白和单克隆抗体生产、药物筛选、基因功能研究等应用。
华美生物多年从事蛋白表达研究,具有大量稳转细胞株开发经验,能够有效提高稳转细胞株的生产能力,改善实验结果,为客户提供过表达稳转细胞株和报告基因细胞株的从基因序列到稳转株交付的一站式服务。
指基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系,其特性在于它们能够持续地表达特定的基因,而不是像瞬时转染那样只能短暂地表达。
应用领域:
- 基因功能研究
- 药物筛选
- 疾病模型建立
- 小分子药物和抗体药开发
通过分子生物学克隆技术,将特定的报告基因(例如荧光素酶)插入到目标细胞的染色体中,经过筛选培养,获得能够稳定表达报告基因的细胞株。
应用领域:
- 基因表达调控研究
- ADCC/ADCP功能验证
- 蛋白质相互作用(信号通路)研究
- Cross-linking药物评价
服务优势:
完善的服务平台
具备完善的细胞、抗体、蛋白等服务平台,能够提供从稳转细胞株构建到重组蛋白生产等一站式技术服务
严格的质控体系
双重检测细菌、支原体等微生物,100%确保无污染;进行细胞活率检测,保证交付质量
稳定传代
高质量交付标准,保证稳定性传代>20代
专业技术支持
专业技术人员定期汇报项目进展,以保证项目顺利推进
技术路线:
服务内容及周期:
宿主细胞检测(1-2周)
- 细胞存活率检测;
- 细胞数量检测;
- 细菌真菌检测;
- 支原体检测。
慢病毒表达质粒构建(2-3周)
- 密码子优化;
- 全基因合成;
- 构建慢病毒表达质粒。
慢病毒包装(1-2周)
- 将表达质粒和辅助质粒共转宿主细胞,进行慢病毒包装。
Cell Pool筛选及验证(1-2周)
- 阳性细胞筛选;
- Cell pool表达量检测。
单克隆筛选及验证(2-3周)
- 单细胞进行铺板,并验证单克隆的表达。
细胞株质控(1-2周)
- 单克隆扩大培养,冻存;
- 复苏存活率检测;
- 细菌真菌及支原体检测。
宿主细胞检测(1-2周)
- 细胞存活率检测;
- 细胞数量检测;
- 细菌真菌检测;
- 支原体检测。
报告基因表达质粒构建(2-3周)
- 密码子优化;
- 全基因合成;
- 构建慢病毒表达质粒。
瞬时转染细胞(1-2周)
- 构建好的报告基因表达质粒瞬转细胞。
Cell pool 筛选及功能活性验证(1-2周)
- 阳性细胞筛选;
- Cell pool表达量检测;
- 药物诱导检测信号通路。
单克隆筛选及验证(7-10周)
- 单细胞进行铺板,并验证单克隆的表达。
细胞株质控(1-2周)
- 单克隆扩大培养,冻存;
- 复苏存活率检测;
- 细菌真菌及支原体检测。
客户提供:
所需细胞株的靶点及宿主细胞信息
最终交付:
① Pool细胞或者单克隆细胞;
② 质检报告(COA)及项目结题报告。