质粒DNA大量抽提试剂盒
产品介绍
质粒DNA大量抽提技术在分子生物学研究中具有广泛的应用。从基础研究到药物开发，从基因功能研究到疾病治疗，质粒DNA的大量制备都是不可或缺的一环。通过质粒DNA的大量抽提，可以获得足够用于后续实验的质粒，从而进行深入的分子分析和功能研究。
华美生物的质粒DNA大量抽提试剂盒采用了SDS-碱裂解法来破碎菌体，得到裂解液后，通过加入特殊设计的内毒素清除剂，有效去除了其中的内毒素。在特定的条件下，质粒DNA样品在重力作用下流经纯化柱时，会与柱子紧密结合。进一步的处理后，质粒DNA可以被充分洗脱下来。最后，通过异丙醇沉淀的方法，实现质粒DNA的浓缩纯化，极大地提高了纯化的效率。
产品优势：
- 适用于大量抽提：本试剂盒设计用于抽提150 ~ 300 mL大肠杆菌质粒，适合大量质粒DNA的提取。
- 内毒素清除：独特的内毒素清除剂能有效去除内毒素，保证质粒DNA的纯度和安全性。
- 高纯度：三步过柱纯化，使质粒DNA纯度提高，内毒素含量极低，可满足细胞转染级要求。
- 高结合能力：每个质粒纯化柱的质粒 DNA 最大结合能力达到1.5mg，提高了纯化效率。
- 无需有毒试剂：整个实验过程不使用苯酚、氯仿等有毒试剂，降低了对实验人员的危害。
产品应用：
提取的质粒 DNA 适用于各种应用，包括限制性酶消化、PCR、测序、连接以及各种细胞实验中的转化和转染。
产品详情
操作流程
验证数据
样品上样量：1 μg
产品组分
| 试剂名称 | 5次 |
|---|---|
| Buffer S1 | 60 mL |
| Buffer S2 | 60 mL |
| Buffer S3 | 60 mL |
| RNase A | 18 mg |
| Wash Buffer | 100 mL*2 |
| ER Buffer | 18 mL |
| Elution Buffer | 60 mL |
| TE Buffer | 5 mL |
| Plasmid Purification MaxiPrep Column | 5根 |
产品保存
RNase：-20°C；
其他组分：15-25°C。
常见问题与解答
Q：质粒裂解过程中，溶液S2加完呈现什么状态是正常的？
A：S2加完后，溶液变为淡黄色的澄清状态，质地略粘稠，打开盖子时略有拉丝。
Q：质粒中和过程中，溶液S3加完呈现什么状态是正常的？
A：S3加完后，溶液出现白色蛋花状沉淀，此时需要观察是否还存在P2溶液加完后的粘稠状团块，如果存在则需要加大幅度混合均匀。
Q：S2溶液在秋冬为什么会析出白色絮状沉淀？
A：S2溶液的成分是SDS和NaOH，其中的SDS在低温时容易结晶析出，在使用前需要提前30-60min放入37℃烘箱或者水浴锅，直至试剂重新恢复澄清透明即可使用。
Q：如果质粒上清离心完还略微浑浊怎么办？
A：如果是批量出现该问题，可以考虑离心时间是否过短，可以适量增加离心时间看看；如果是个别样品浑浊，可以分装到EP管内重新离心3-5min，再吸取上清过滤，个别上清液肉眼看是澄清的，但是过滤时非常堵塞，也可以重新离心后再过滤。
Q：如果质粒跑胶时有RNA残留怎么办？
A：如果是批量的有RNA残留，可以适当降低异丙醇的量，正常情况异丙醇的量是洗脱液的70%，但是异丙醇过多会吸附过多的DNA和RNA片段，具体用量可以根据具体实验情况调整；此外还可能是RNA酶失活，在第一步重悬菌体的时候RNA并没有消化完全。
