先导抗体分子发现服务

抗体药以细胞、基因工程技术为主体的抗体工程技术进行制备，与靶抗原结合具有高特异性、有效性和安全性，临床用于恶性肿瘤与自身免疫疾病等重大疾病，是发展迅速的生物制剂药物，近年来成为新药开发中主要的类别。

抗体药的研发，从最初的确定靶点，到筛选先导分子，做临床前研究，再到进入临床1/2/3期试验，以及完成最后的NDA申报，整个流程至少需要耗费10年的时间。在整个抗体药物研发过程中，治疗性抗体的发现是抗体药物开发的最初阶段，也是至关重要的。

华美生物17年来一直致力于蛋白质和抗体的研发和生产，并且已经成功地为多家制药公司筛选了100多个治疗性抗体候选物，其中许多已经进入了CMC或IND阶段。对于一些具有挑战性的靶点，包括CLDN18.2、CLDN6、CCR8、SSTR2、DLL3、LY6G6D、ROR1、SEMA4D、GPC3、CD16A等，我们不仅成功生产了抗原，还成功筛选出相应的重组抗体。

华美生物拥有5大蛋白表达系统，针对多次跨膜蛋白表达的三大技术平台（VLPs、去垢剂、Nanodisc），针对小分子量蛋白表达的Nanoparticle平台，已成功完成30多个针对多次跨膜蛋白的筛选服务项目。优秀的抗原制备技术平台以及丰富的抗体筛选经验，保证了华美生物可为您提供从目标到治疗性抗体候选物的一站式解决方案，加快整个药物开发进程。

服务流程

一、原材料准备

● 抗原制备

华美生物拥有16年重组蛋白表达经验，可提供从基因合成、载体构建到蛋白表达及纯化的一站式服务。针对药靶蛋白，在原有的五大重组蛋白表达系统（大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞和无细胞蛋白表达系统）的基础上，经过不断探索与优化，华美生物现已推出四大优势药靶蛋白表达平台，分别是病毒样颗粒 (VLPs) 技术平台、去垢剂技术平台、Nanodisc技术平台和Nanoparticle 表达平台。

病毒样颗粒 (VLPs) 技术平台-跨膜蛋白

展示多次跨膜蛋白的天然构象，具有完整生物活性
可提高免疫原性，打破机体自身的免疫耐受
包膜VLPs中靶抗原丰度高于过表达细胞
大小为100-150nm，是噬菌体展示的最佳靶点
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI，助力先导抗体发现

Nanodisc技术平台-跨膜蛋白

近似于细胞膜环境，展示完整构象，保持生物活性
不含去垢剂，适用于对去垢剂有干扰的实验
可直接用于噬菌体筛选（提供空nanodisc反筛）
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/细胞实验

去垢剂技术平台-跨膜蛋白

可全长表达多次跨膜蛋白，不仅仅只限于ECD表位
可精确定量，区别于VLPs和Nanodisc平台
可应用于免疫/ELISA/SPR/BLI

Nanoparticle 表达平台-小分子量蛋白

展示天然构象，具有完整生物活性
可增强免疫反应
可直接用于噬菌体筛选（提供空的Nanoparticle反筛）
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/细胞实验

● 阳性抗体制备

阳性抗体又称药物对照抗体，通常用于检测抗原或稳定细胞株，以确定抗原或稳定细胞株是否合格。此外，它还可作为筛选FACS（荧光激活细胞分选）抗体的对照。阳性抗体的优先顺序如下：上市的抗体药物，临床阶段（Ⅰ-Ⅲ）的抗体药物，临床前阶段的抗体药物，以及FACS抗体。

● 稳转细胞株构建

稳转细胞株是指通过稳定转导持续稳定表达或干扰特定基因表达的细胞系。在抗体开发领域，稳转细胞株可以作为免疫原刺激动物的特异性免疫反应，可针对多跨膜蛋白的靶点。此外，稳转细胞株广泛用于抗体结合和功能筛选实验。华美生物可提供稳转细胞株构建服务，具体服务内容如下：

序列	步骤	服务内容	周期
慢病毒包装构建稳转细胞服务
1	表达载体构建	密码子优化、全基因合成、构建慢病毒表达载体，质粒大抽	2-3周
2	慢病毒包装	将表达载体和辅助质粒共转293T细胞，进行慢病毒包装	1-2周
3	Cell pool筛选及验证	用相应筛选剂筛选出阳性细胞，检测cell pool表达量	1-2周
4	单克隆筛选及验证	单细胞进行铺板，并验证单克隆表达量	3-4周
5	单克隆冻存及QC	单克隆扩大培养、冻存、复苏检测活率及微生物污染	1-2周
总时间			8-12周

CELL POOL检测

单克隆筛选

二、小鼠免疫

GMP级别动物房

多种类型的小鼠

多种免疫方案

三、抗体筛选

华美生物具有十六年丰富杂交瘤单抗开发经验，技术路线成熟，产品质量稳定可靠，高成功率。初步阳性率高达20%-40%左右，流式阳性率达到10%-20%左右，可满足不同类型客户需求。

四、质控（抗体功能检测）

针对筛选获取的先导分子抗体，华美生物会根据客户需求进一步做抗体功能检测，包括抗原ELISA、细胞FACS、抗原SPR及抗原binning检测。抗原ELISA和抗原SPR主要检测抗原抗体的结合活性与亲和力，细胞FACS检测抗体与细胞的结合活性，抗原binning检测鉴定筛选的先导抗体分子和阳性抗体识别的抗原表位是否一致。