ELISA 试剂盒质控流程
华美生物严格的生产和质控标准是ELISA试剂盒质量的根本保障。华美生物ELISA试剂盒的质控指标包括：供线性范围，线性，检测下限，精度，回收率，稳定性和天然样品检测。指标详情如下：
1、线性范围
通过线性范围，我们可以计算出待测试样本值。下图为CSB-E07270h（人脂联素，ADP ELISA试剂盒）的标准曲线。
| ng/ml | OD1 | OD2 | Average | Corrected |
|---|---|---|---|---|
| 100 | 2.839 | 2.897 | 2.868 | 2.718 |
| 50 | 1.968 | 1.974 | 1.971 | 1.821 |
| 25 | 1.144 | 1.192 | 1.168 | 1.018 |
| 12.5 | 0.709 | 0.733 | 0.721 | 0.571 |
| 6.25 | 0.433 | 0.450 | 0.441 | 0.291 |
| 3.125 | 0.303 | 0.301 | 0.302 | 0.152 |
| 1.562 | 0.242 | 0.223 | 0.233 | 0.083 |
| 0 | 0.149 | 0.151 | 0.150 |
2、线性
线性是实验准确性和特异性的测试指标。为了测定线性，在基质中加入高浓度分析物的样品并用样品稀释液稀释，生成的产物可在测定的动态范围内有值，结果表示为观察到的百分比。
以CSB-E07270h（人脂联素，ADP酶联免疫吸附试剂盒）为例：
血清样品稀释比分别为：1：100、1：200、1：400和1：800。
细胞培养物上清液稀释比分别为1：1、1：2、1：4和1：8。
测试值在80-120％之间并显示出良好的线性。
| Sample | Serum(n=4) | |
|---|---|---|
| 1:100 | Average( %) | 91 |
| Range ( %) | 85-97 | |
| 1:200 | Average( %) | 97 |
| Range ( %) | 91-103 | |
| 1:400 | Average( %) | 93 |
| Range ( %) | 85-95 | |
| 1:800 | Average( %) | 95 |
| Range ( %) | 90-100 |
| Sample | Cell Culture Supernates(n=4) | |
|---|---|---|
| 1:1 | Average( %) | 97 |
| Range ( %) | 80-100 | |
| 1:2 | Average( %) | 95 |
| Range ( %) | 91-110 | |
| 1:4 | Average( %) | 90 |
| Range ( %) | 85-95 | |
| 1:8 | Average( %) | 96 |
| Range ( %) | 90-100 |
3、检测下限
检测下限是灵敏度检测指标。检测下限越低，灵敏度越高。
4、精度
精度是重复性的检测指标，是从平均值中测量的变异系数（CV）。 精度越高，重复性越好。 常考虑的精度有两种：批内精度和批间精度。
批内精度：批内精度是测定中孔之间的可重复性。在一个平板上反复检测三个已知浓度的样品达二十次来评估CSB-E07270h（人脂连蛋白，ADP ELISA试剂盒）的精确度：CV％<8％。
批间精度：批间精度是分析不同批次间的可重复性。 在20批次中，检测三个已知浓度的样品以评估CSB-E07270h（人脂联素，ADP ELISA试剂盒）的精确度：CV％<10％。
| Intra-Assay Precision | Inter-Assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/ml) | 13.215 | 12.894 | 13.438 | 12.897 | 13.109 | 12.963 |
| SD | 0.63 | 0.37 | 0.53 | 1.10 | 0.81 | 1.00 |
| CV(%) | 4.75 | 2.847 | 3.931 | 8.562 | 6.145 | 7.741 |
5、回收率
回收率是实验准确性和特异性的检测指标，它反映了样品分析过程中分析物的损失程度。 回收率越高，精度越高。
华美生物试剂盒，在各种基质中，分析物的回收率在整个测定范围内都达到了很高的水平。
下图为CSB-E07270h（人脂连蛋白，ADP ELISA试剂盒）的回收率：
| Sample Type | Average(%) | Range(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=5) | 95 | 89-98 |
| EDTA plasma (n=4) | 97 | 90-100 |
6、试剂盒组分稳定
一般来说，稳定性越好，存储时间越长。试剂盒组分稳定性检测：将华美生物ELISA试剂盒的主要原料和测定板置于37℃下热损伤测试7天，然后再与4℃下储存的原料进行比较。若是7天后，原料OD值≤30％，即为合格产品。
7、特异性
特异性是ELISA试剂盒质量的关键指标。华美生物ELISA试剂盒均选用高特异性原料，以确保ELISA试剂盒的特异性。另外，研发团队会进一步分析试剂盒的交叉反应，进一步确认该试剂盒能且只能识别和检测目的分析物。
8、天然样品检测
天然样品检测对于ELISA试剂盒的推广至关重要。 华美生物ELISA试剂盒可以检测自然样品，样品值均可供用户参考。 对于CSB-E07270h（人脂联素，ADP ELISA试剂盒），我们在之前以1：500稀释度测试血清和血浆样品，测试值为S3-S5。
